Recombinant Enterokinase重組腸激酶

產品簡介
　　腸激酶（Enterokinase）是一種蛋白酶，高度專一性識別天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-賴氨酸（Asp-Asp-Asp-Asp-Lys，DDDDK）序列，切割賴氨酸羧基端肽鍵，去除位于蛋白質N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合標簽，釋放出目的蛋白。重組腸激酶（Recombinant Enterokinase，rEK）是高純度純化的牛腸激酶輕鏈亞基，它與天然提取的腸激酶具有同樣特異的切割酶活性，且切割速率更快。
　　李記生物研發的重組腸激酶，采用重組酵母分泌表達，純度高、活性高，可以在較寬pH范圍（pH4.5～9.5）和溫度范圍（4～45℃）有效切割，不含其它蛋白酶，并且在各種去垢劑和變性劑存在的條件下仍具有部分活性。
　　重組腸激酶（rEK）被廣泛地應用于基因工程產品的開發，例如，作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質的特異性切割，尤其適用于生物工程制藥業及基因工程、生物化學、分子生物學等研究。產品特性見表1。
訂購信息 

保存方法
-20℃保存，冰袋運輸。質保期12個月
使用方法（參考舉例）
1. 反應體系構建，以1000 μL為例，反應體系如下：

【注】：10× rEK反應緩沖液配方：0.5 M Tris-HCl，pH 8.0（22℃），10 mM CaCl₂，1% Tween-20。
2. 25 ℃過夜酶切，可用SDS-PAGE檢測酶切效果。
3.（可選）本品具有高活力的重組腸激酶，切割蛋白使用量少，可不考慮去除。后續如需去除重組腸激酶，可用陰離子交換樹脂（eg.DEAE-FF）對其進行洗脫。推薦洗脫條件如下：平衡緩沖液：25 mM Tris-HCl，pH8.0；洗脫緩沖液：25 mM Tris-HCl ，pH8.0，含100 mM NaCl。
注意事項

1. 樣品溶液含有在>2 mM 尿素，或>250 mM NaCl，或>20 mM β-ME，或>0.1% SDS，或>50 mM咪唑條件下，為獲得理想的酶切結果，請先將樣品透析到1×反應緩沖液中，然后再進行酶切實驗。
2. 磷酸鹽對Enterokinase有很強的抑制作用，少量的磷酸鹽都會嚴重影響Enterokinase的活性,因此在酶切
    
   體系內不能存在磷酸鹽。

表1：產品特性
 
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